28°C температурада 25 көн статик инкубациядән соң, *Pleurotus ostreatus* NRC620 лакзасы гөмбә культурасы мохитендә иң югары активлык күрсәтте. Бу фермент өчен оптималь рН һәм температура күрсәткечләре 3,0 һәм 70°C тәшкил итте. 40°C һәм 50°C температурада 2 сәгать инкубациядән соң, фермент активлыгы 68,33% һәм 59,61% сакланды. Цитрат-фосфат буферында (рН 7,0) 2 сәгать инкубациядән соң, фермент активлыгы 100% калды. 10 мМ MgSO₄ һәм CuSO₄ өстәү фермент активлыгын якынча 21% һәм 35% ка арттырды, ә NaCl, MnCl₂, KCl һәм CaCl₂ фермент активлыгын тоткарлады. ABTSны субстрат буларак кулланып, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказасының кинетик параметрлары (Km һәм Vmax) 1,99 мМ һәм 16,217 мкмоль мин−1 L−1 тәшкил итте. Алма согы үрнәкләрен ферментатив эшкәртү pH һәм ябышлыкны сизелерлек киметте, һәм бу кимү саклау вакыты арту белән бәйле иде. Лакказа белән эшкәртү алма согының гомуми фенол күләмен бераз киметүгә китерде, ләкин антиоксидант активлыгы кимүе күзәтелмәде.
Соңгы елларда тикшеренүчеләр азык-төлек сәнәгатендә яшел биотехнологияне куллануга игътибар иттеләр. Лакказа - азык-төлек сәнәгатендә иң файдалы ферментларның берсе, ул сок эшкәртү, пешерү, шәрабны тотрыклыландыру һәм азык-төлек продуктларының органолептик сыйфатларын яхшырту кебек өлкәләрдә кулланыла.1Күп кенә югары үсемлекләр һәм микроорганизмнар лактаза бүлеп чыгара,2һәм дейтеромицетлар, аскомицетлар һәм базидиомицетлар кебек гөмбәләр дә лакказа җитештерә ала.3Лакказа (EC 1.10.3.2) - өч төрле бакыр атомыннан торган система ярдәмендә молекуляр кислородны суга әйләндерә торган зәңгәр оксидаза, шуның белән төрле фенол кушылмаларын һәм ароматик аминнарны оксидлаштыра. Җиләк-җимеш һәм яшелчә соклары җитештерү барышында ферментатив һәм ферментатив булмаган көрән төскә күчү бик мөһим мәсьәләләр булып тора.4Бу матдәләр сокның төсенә, тәменә һәм хуш исенә тискәре йогынты ясаганлыктан, аларны алып ташларга кирәк.5
Барлык җимешләр арасында алма дөнья күләмендә һәм Европа Берлегендә иң күп кулланыла торган җимеш. 2019 елда алма җитештерү дөнья күләмендә өченче урынны алды, 87 миллион тоннадан артып китте.6Алмада күп санлы фенол кушылмалары, шул исәптән флавоноидлар һәм кофеин кислотасы һәм хлороген кислотасы кебек фенол кислоталары бар.7Алма согы гадәттә үтә күренмәле формасында кулланылганлыктан, фильтрлау процессында фенол компонентларының якынча 50% тан 90% ка кадәр өлеше югала.8Бүгенге көндә кулланучылар, гадәттә, аз эшкәртелгән продуктларны сайлыйлар, мәсәлән, полифенол күләме югары булган тонык алма согы. Ләкин, аның фенол күләме югары булу сәбәпле, бу төр алма согы, бигрәк тә, төсен үзгәртүгә һәм караңгыланырга бирешүчән.9Алма согының караңгылануын киметү яки булдырмас өчен төрле технологияләр, шул исәптән 60–90°C температурада пастеризацияләү кебек җылылык белән эшкәртү ысуллары кулланыла.10Ләкин, Сауседа-Гальвез тикшеренүләре буенча11, термик эшкәртү очучан химик матдәләрне юк итәргә һәм алма согының органолептик сыйфатларына тәэсир итәргә мөмкин. Термик эшкәртү ысулларына альтернатива буларак, суперкритик углекислый газ, ультрафиолет нурланышы, ультратавыш, югары гидростатик басым яки югары басымлы гомогенизация керә.12Бу технологияләрнең нәтиҗәлелеге һәм яраклы җимеш сокларының күләме кулланылган параметрларга һәм продукт үзенчәлекләренә бәйле. Аларның киң кулланылышы югары чыгымнар, кайбер азык-төлек продуктларының сыйфатына тискәре йогынты яки ферментларның тиешенчә активлаштырылмавы белән чикләнә.13,14
Лакказа җимеш согын тотрыклыландыру һәм ачыкландыру өчен кулланылырга мөмкин.15Гөкмен һ.б.16җимеш согын ачыклау өчен лакказа куллануны тәкъдим итәм, чөнки ул фенол кушылмаларын полимерларга яки олигомерларга әйләндереп, аларны теләсә нинди ультрафильтрация мембранасы белән җиңел бетерелә торган полимерларга яки олигомерларга әйләндереп, алма согына 50°C температурада алты атнага кадәр тотрыклы төс һәм ачыклык сакларга мөмкинлек бирә. Чистартылган *Trichoderma* лакказасы алюминий оксиды бөртекләренә иммобилизацияләнде һәм алма согының микроб пычрануы аркасында килеп чыккан тәмсез кушылмаларны сайлап бетерү өчен кулланылды.17
Алма согының очучан компонентларының якынча 80-90% ын эфирлар һәм альдегидлар тәшкил итә, алар сокка үзенчәлекле хуш ис бирә.18*Trametes versicolor* лакказесы алма согын чистарту өчен яшь кокос кабыкларыннан алынган табигый җепселләрдән ясалган арзан терәккә иммобилизацияләнгән.19Элегрәк үткәрелгән тикшеренүләрдә алма согының тотрыклылыгы (төсе һәм тоныклыгы) ферментсыз яки иммобилизация ысуллары ярдәмендә, яки ультрафильтрация белән берлектә тикшерелгән.5,19Шулай да, саклау вакытында алма согының физик-химик үзлекләренә гөмбә лакказаларының йогынтысы ачык түгел. Шуңа күрә бу тикшеренүнең максаты - гөмбә лакказалары белән эшкәртелгәннән һәм ике атна суыткычта сакланганнан соң алма согының физик-химик үзлекләрендәге, фенол кушылмалары составындагы һәм антиоксидант активлыгындагы үзгәрешләрне эксперименталь рәвештә тикшерү. Лакказалар фенол кушылмаларын оксидлаштыру сәләтенә ия, бу аларны төрле сәнәгать процессларында, шул исәптән сокны ачыклауда куллану өчен перспективалы итә. Бу тикшеренүдә *Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказалары тикшерелде, аларның активлыгы һәм сокны ачыклаудагы нәтиҗәлелеге өчен идеаль шартларга игътибар ителде. Устрица гөмбәләре (P. ostreatus NRC 620) буенча тикшеренүләр әле дә чикләнгән булса да, алдагы тикшеренүләрдә Trametes versicolor һәм Ganoderma lucidum кебек төрле гөмбә чыганакларыннан алынган ферментлар тикшерелде. Бу тикшеренүнең максаты - бу ферментның азык-төлек сәнәгатендә кулланылышын бәяләү һәм аның уникаль үзлекләрен, аеруча идеаль рН һәм температураны ассызыклау.
2,2′-Азооксибис(3-этилбензотиазолин-6-сульфон кислотасы) (ABTS) Sigma-Aldrich (Канада) компаниясеннән сатып алынган. Башка барлык реагентлар да аналитик сыйфатлы иде.
Милли тикшеренү үзәгенең Микроб культураларын җыю үзәге билгеле устрица гөмбәсе NRC620 штаммын алды. Субкультурадан соң, бу штамм бәрәңге декстроза агары авышлыкларында 4°C температурада сакланды. Инокулят әзерләү ысулы түбәндәгечә иде: 10 көнлек, тулысынча үскән мицелий бәрәңге декстроза агары тәлинкәләренә инокуляцияләнде һәм 28°C температурада инкубацияләнде. 10 көннән соң, агар мохитеннән стериль металл перфоратор ярдәмендә өч 12 мм диаметрлы мицелий блоклары алынды һәм 250 мл Эрленмейер колбаларына 50 мл стерильләштерелгән культура мохите (рН 5.0, Отман һ.б. тарафыннан алдан тасвирланганча) салынган мамык тыгыннары белән урнаштырылды.20). Культуралар 28°C температурада 18 көн инкубацияләнде. Аннары культуралар Whatman № 1 фильтр кәгазе аша фильтрланды, һәм барлыкка килгән өслек катламы фермент чыганагы булып хезмәт итте.
Лакказа активлыгы субстрат буларак ABTS кулланып билгеләнде. Реакция катнашмасы (2 мл) составында 500 мкл 0,3 мМ ABTS (0,1 М натрий цитраты буферында эретелгән, рН 4,5) һәм дистилляцияләнгән су белән суытылган фермент үрнәгенең кирәкле күләме бар иде.21,22Лактаза бүлмә температурасында (28 °C ± 2) ABTSны оксидлаштыра алуын исәпкә алып, ABTS оксидлашуы 420 нм (ε) да абсорбция артуын үлчәү юлы белән билгеләнде.420= 36,000 см-1 M -1) Agilent Carry-100 UV спектрофотометры ярдәмендә. Минутына 1 мкмоль ABTS оксидлаштыру өчен бер лактаза активлыгы берәмлеге кирәк иде. Аксым концентрациясе эчке контроль буларак сыер кан сарысуы альбуминын кулланып, Брэдфорд ысулы белән билгеләнде.23,24
Устрица гөмбәсе NRC 620 штаммыннан фермент алганнан соң, аның активлыгы 28 °C температурада статик шартларда 25 көн дәвамында төрле үстерү интервалларында үлчәнде.
Температураның лакказа активлыгына йогынтысын өйрәнү өчен, 20 дән 90 °C га кадәр температура диапазонында тәҗрибәләр үткәрелде. Ферментны өстәр алдыннан һәм реакцияне башлар алдыннан, буфер (0,1 М натрий цитраты, pH 4,5) һәм субстрат (ABTS) кушылды һәм төрле температураларда 5 минут инкубацияләнде. Ферментның термик тотрыклылыгы 0,05 М натрий фосфаты буферында (pH 7,0) 40, 50, 60 һәм 70 °C температурада 2 сәгать инкубацияләү юлы белән бәяләнде. Аннары калдык активлык ABTS субстраты ярдәмендә бәяләнде.
Лакказа активлыгына рН йогынтысы 2,5-7,0 pH диапазонындагы 0,1 М цитрат-фосфат буферларында субстрат буларак ABTS кулланып бәяләнде. Фермент эремәсе рН тотрыклылыгын бәяләү өчен 40°C температурада ике сәгать дәвамында 0,1 М цитрат һәм Tris буферларында (рН 3, 4, 6 һәм 7) инкубацияләнде. ABTS субстрат буларак кулланылганда калдык активлык инкубациядән соң исәпләнде.
Лакказа төрле металл ионнарын (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+ һәм Mn2+) үз эченә алган натрий фосфаты буферында (0,05 М, рН 7,0) 2,5 мМ һәм 10 мМ концентрацияләрдә 10 минут инкубацияләнде. Аннары реакцияне башлау өчен субстрат (ABTS) өстәлде, һәм чагыштырма активлык бәяләнде.
Кинетик параметрларны (Vmax һәм Km) билгеләү өчен төрле концентрацияләрдә (0,025–3 мМ) лакказа белән ABTS оксидлашуы рН 4,5 дәрәҗәсендә үлчәнде. КинетикдаимиләрМихаэлис-Ментен тигезләмәсенең күләмнәре Лайнвивер-Бурк графигы ярдәмендә исәпләнде, ул реакция тизлегенең субстрат концентрациясе функциясе буларак кире кыйммәтен күрсәтә. Кинетик константалар GraphPad Prism 6.01 версиясе программасын кулланып Лайнвивер-Бурк графигыннан исәпләнде.
Алмаларны кран суы белән яхшылап юганнан соң, алар икегә бүленде һәм тулысынча автоматик Braun MP80 алма согы сыккыч (Германиядә җитештерелгән) ярдәмендә сок сыгылды. Сок дүрт катлам марля аша фильтрланды. Контроль төркеменә ферментлар өстәлмәде, ә яңа әзерләнгән алма согына 2,0% лактаза (сыналган иң нәтиҗәле концентрация) өстәлде, аннары ул 4°C температурада ике атна сакланды.
Титрланучы кислоталык (TA) һәм рН Боултон һ.б. методы буенча билгеләнде.ал.27Һәр үрнәкнең pH дәрәҗәсе цифрлы pH үлчәгеч (JENWAY 3510 pH метр) ярдәмендә үлчәнде. Титрлаучан кислоталык (TA) түбәндәге формула ярдәмендә алма кислотасы нигезендә исәпләнде.
Монда V һәм C - титрлауда кулланылган натрий гидроксиды эремәсенең күләме (мл) һәм концентрациясе (0,1 моль/л). K - алма кислотасының әйләнү коэффициенты, 0,067 гә тигез, ә W - алма согының массасы (г).
Барлык эри торган каты матдәләр (TDS) барлык сок үрнәкләренең эчтәлеге PAL-1 кесә рефрактометры (ATAGO, Токио, Япония) ярдәмендә билгеләнде. Һәр үлчәүдән соң оптик линза деионизацияләнгән су белән чайкалды, һәм һәр алма согы үрнәге өч тапкыр тикшерелде. Һәр үрнәк өчен кыйммәт өч үлчәүнең уртача күрсәткече белән исәпләнде. Һәр алма согы үрнәге өчен уртача ± стандарт тайпылыш та бу нәтиҗәләрнең уртача күрсәткече белән исәпләнде.
Алма согы үрнәкләренең вискоэластиклыгы әйләнмәле вискозиметр (RV, Rheotest 2, Германия) ярдәмендә бәяләнде. Үрнәк вискозиметрның "S2" цилиндрына урнаштырылды. Күренмә ябышлык кисү көчәнешенең кисү тизлегенә карата кәкрелеге белән күрсәтелде, ул кисү көчәнеше һәм төрле кисү тизлекләрендәге тиешле кәкреләрдән исәпләнде (1,00 дән 437,4 с⁻¹ га кадәр). Күренмә ябышлыкны исәпләү формуласы түбәндәгечә:
Монда η - күренмәле ябышлык (cP), τ - кисү көчәнеше (dyn/cm²), γ - кисү тизлеге (sec⁻¹), һәм (τ) момент (α) һәм цилиндр (Z) кыйммәтләре ярдәмендә түбәндәге формула буенча исәпләнә: τ = Z α.
Браунлаштыру индексы Мейдав һ.б. методы буенча билгеләндеал.2910 мл сок үрнәге 2750 xg көчәнештә 10 минут дәвамында центрифугаланды. 5 мл сок өслеге 5 мл 95% этанол белән кушылды. Катнашманың абсорбциясе 420 нм да Shimadzu UV спектрофотометры (UV-1601 PC) ярдәмендә үлчәнде.
Фенолның гомуми күләме (ТФК) Боултон һ.б. тасвирлаганча, Фолин-Чиокалтеу реактивын кулланып колориметрик рәвештә билгеләнде.[27]0 дән 500 мг/л га кадәр концентрацияләр өчен галл кислотасының стандарт сызыгы төзелде (r²= 0.997). Нәтиҗәләр галл кислотасы эквивалентлары рәвешендә күрсәтелә (мг GAE/мл).
25 мкл алма согына 125 мкл дистилляцияләнгән су һәм 2850 мкл FRAP эремәсен өстәгез һәм катнашманы караңгы урында калдырыгыз.30мин. Аннары Shimadzu UV спектрофотометры (UV-1601 PC) ярдәмендә 593 нм да абсорбцияне үлчәгез. FRAP реагенты 300 мМ ацетат буферын (рН 3.6), 20 мМ тимер(III) хлоридын һәм 10 мМ 2,4,6-трис(2-пиридил)триазинны (TPTZ) (40 мМ HCl да эретелгән) 10:1:1 нисбәтендә кушып әзерләнде. Стандарт сызык Trolox кулланып төзелде (R²= 0.999), һәм нәтиҗәләр μM Trolox/мл буларак күрсәтелә.
Эшкәртелгән һәм эшкәртелмәгән сокларның антиоксидант активлыгы DPPH ирекле радикалларын чистарту сәләтен бәяләү өчен DPPH ысулы ярдәмендә билгеләнде.31Ун микролитр сок метанолдагы 1 мл DPPH эремәсе (100 мкМ) белән кушылды. Караңгыда 30 минут реакция үткәргәннән соң, катнашманың абсорбциясе 517 нм да Shimadzu UV спектрофотометры (UV-1601 PC) ярдәмендә үлчәнде. Нәтиҗәләр калибрлау кәкресенә нигезләнеп, тролокс эквивалентлары (μM тролокс/мл) буларак күрсәтелде (R2= 0.990).
Алынган мәгълүматлар күрсәткәнчә, NRC 620 устрица гөмбәләрендә лакказа җитештерүнең максималь күләме ферментациянең 18 нче көне ахырына кадәр күзәтелгән, ул 1302 U/L активлыкка җиткән. Бу лакказа җитештерү өчен оптималь үстерү вакытын билгеләү өчен нигез булып хезмәт иткән (1 нче рәсем). Фермент җитештерү үстерү вакыты арткан саен артса да, үсеш тизлеге үстерү вакытына турыдан-туры пропорциональ түгел иде; 21 көннән соң фермент активлыгы нибары 90 U/L гына арткан (1390 U/L га кадәр). Шуңа күрә, продукт уңышын үстерү вакытын арттыруның икътисади файдасы белән тигезләү өчен оптималь үстерү вакыты буларак 18 көн сайланган.
Pleurotus ostreatus NRC 620 гөмбәсендә лакказа уңышына үстерү вакытының йогынтысы. Өч (12 мм) гөмбә мицелий блоклары 50 мл стериль мохиткә кертелде, аннары 28 °C температурада төрле вакытларда үстерелде.
Башка тикшеренүләр белән туры китереп, безнең нәтиҗәләр гөмбәләрнең лактаза бүленеп чыгуының иң югары ноктасына ирешү өчен идеаль культура чоры 7 дән 36 көнгә кадәр булуын күрсәтә.32Эзике һ.б. фикеренчә,33, *Trametes polyzona* WRF03 ферментациянең тугызынчы көне ахырына иң югары күләмдә лактаза җитештерде, аның чагыштырма активлыгы 1637 U/мг аксым тәшкил итте. Моннан тыш, Отман һ.б.34*Trichoderma harzianum* S7113 культурасының бишенче көнне күп күләмдә лактаза бүлеп чыгаруын ачыкладылар. Лактаза җитештерү тизлеге ундүртенче көнне иң югары активлыкка иреште һәм аннары әкренләп кимеде.34Фермент бүленеше төп үсеш фазасында да булырга мөмкин булса да, ул гадәттә арадаш фазада иң югары ноктасына җитә һәм углерод яки азот чыганагын куллану белән башлана.34,35
Pleurotus ostreatus NRC 620 лаказасы 50°C тан 80°C га кадәр киң температура диапазонында югары активлык күрсәтсә дә, иң югары активлыкка якынлашса да (69–98%), аның максималь активлыгы 70°C температурада күзәтелде (2a рәсем). Бу температура диапазоныннан тыш, фермент активлыгы якынча 70°C температурада кимеде. Бу нәтиҗәләр ферментның югары температурада актив булуын күрсәтә, чөнки югары температура реакциянең кинетик энергиясен арттыра.
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 да лакказа активлыгына реакция температурасының (а) һәм рН (б) йогынтысы. 20 дән 90 °C га кадәр температурага фермент өстәр алдыннан һәм реакцияне башлар алдыннан катнашманы төрле температураларда 5 минут алдан инкубацияләү юлы белән ирешелде. рНның лакказа активлыгына йогынтысы 2,5 дән 7,0 гә кадәр рН диапазонында 0,1 М цитрат-фосфат буферы булган эретмәләрдә субстрат буларак ABTS кулланып бәяләнде.
Эзике һ.б. буенчаал.33, *Trametes polyzona* WRF03 лакказасы өчен оптималь температура 55 °C тәшкил итә, бу *Ganoderma lucidum* өчен булган температура белән бер үк.laccase36һәм *Trametes polyzona* KU-RNW02737 өчен оптималь температурага (50 °C) охшашлактаза . Baldrian38башка лигнинны таркатучы фермент системалары кебек үк, лакказа өчен идеаль температура диапазоны 50 дән 70 °C га кадәр булуын билгеләп үтә.
Нәтиҗәләр күрсәткәнчә, фермент рН 3.0 да иң югары активлык күрсәтә, рН 3.5 тә 94% активлыкка җитә. Шулай да, ул 2.5 тән 7.0 гә кадәр киң рН диапазонында актив булып кала (2б рәсем). Моннан тыш, ул нейтраль яки селте шартлар белән чагыштырганда кислоталы шартларда югарырак активлык күрсәтә. Аның активлыгы 2.5 тән 4.5 гә кадәр рН диапазонында ким дигәндә 77% тәшкил итә, ләкин рН 7.0 да якынча 38% ка гына җитә. *Trametes polyzona* WRF03 дан алынган лакказа өчен оптималь рН 4.533 тәшкил итә, бу *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40 һәм *Trametes hirsuta* 41 дан алынган лакказалар өчен рН белән бер үк. Ләкин, Чайрин һ.б. тикшеренүләре буенча.42, *Polymorpha f. sp.* WR710-1 лакказасы өчен оптималь рН 2,2 тәшкил итә, ә *Polymorpha f. sp.* IBL-04 лакказасы өчен оптималь рН 5,043 тәшкил итә. Гидроксид анионнарының (лакказа ингибиторы) T2/T3 лакказасының бакыр атомнарына бәйләнеше нейтраль яки селте рН шартларында лакказа активлыгы кимүенең сәбәбе булырга мөмкин. Бу T1 үзәгеннән T2/T3 үзәгенә эчке электрон күчерүен бозарга мөмкин, шуның беләнчикләүчефермент активлыгы 23,44
Ферментны төрле температураларда инкубацияләү нәтиҗәсендә, инкубация вакыты да, температура да фермент тотрыклылыгына тәэсир итүе ачыкланды. Шунысы игътибарга лаек, *Trametes polyzona* NRC 620 лакзасы 40℃ һәм 50℃ температурада югарырак тотрыклылык күрсәтте, 120 минуттан соң башлангыч активлыгының 68,33% һәм 59,61% ын саклап калды (3a рәсем). Киресенчә, шул ук шартларда (40℃ һәм 50℃, 120 минут), *Trametes polyzona* WRF03 лакзасы үз активлыгының 64,38% һәм 42,92% ын саклап калды.33Киресенчә, инкубация вакытын һәм температураны арттыру *Trametes polyzona* NRC 620 лакказасының тотрыклылыгын киметкән; 60℃ һәм 70℃ температурада 60 минут инкубацияләгәннән соң, аның активлыгы 39,24% һәм 1,72% ка кадәр төшкән (3a рәсем). Эксперименталь нәтиҗәләргә туры китереп, *Trametes polyzona* WRF03 лакказасы термик эшкәртү процессында 40 һәм 50℃ температурада югарырак тотрыклылык күрсәткән.33Шулай ук, Луангжароенкит һ.б.ал.37һәм Чайрин һ.б.ал.42Trametes polyzona KURNW027 һәм Trametes polyzona WR710-1 лакказаларының 50 °C температурада 1 сәгать дәвамында тотрыклылыгы турында хәбәр иттеләр. Төрле биотехнология өлкәләрендә кулланыла торган файдалы биокатализатор буларак, лакказа киң температура диапазонында яхшы тотрыклылыкка һәм эшчәнлеккә ия булырга тиеш.
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакцазының термостатик тотрыклылыгы (а) һәм рН тотрыклылыгы (б). Термостатик тотрыклылык фермент эремәсен 0,05 М натрий фосфаты буферында (рН 7,0) 40, 50, 60 һәм 70 °C температурада 2 сәгать инкубацияләү юлы белән бәяләнде. рН тотрыклылыгы фермент эремәсен 0,1 М цитрат буферында һәм Tris буферында (рН 3, 4, 6 һәм 7) 40 °C температурада 2 сәгать инкубацияләү юлы белән бәяләнде. Калдык активлык инкубациядән соң субстрат буларак ABTS кулланып исәпләнде.
Ферментларны куллану һәм саклау өчен оптималь шартларны билгеләү өчен, без рНның лакказа тотрыклылыгына йогынтысын тикшердек. Төрле рН кыйммәтләренә дучар булу аксым структурасының тотрыклылыгына сизелерлек йогынты ясады, шуның белән фермент молекуласының тотрыклылыгына һәм активлыгына йогынты ясады. Нәтиҗәләр күрсәткәнчә, фермент кислоталы шартларда тотрыклырак түгел, ә югарырак рН кыйммәтләрендә (нейтраль һәм селте өлкәләре) яхшырак тотрыклылык күрсәтте. 7,0, 6,0, 4,0 һәм 3,0 рН кыйммәтләрендә, 120 минуттан соң ферментны тоту дәрәҗәсе якынча 100%, 62,54%, 52,39% һәм 11,14% тәшкил итте (3б рәсем). *Strombus multisus* WRF03 лакказасы нейтраль рН кыйммәтләрендә югарырак тотрыклылык (5,5–6,5) һәм кислоталы рН кыйммәтләрендә түбәнрәк тотрыклылык (4,0 дән түбән) күрсәтте. 5,5, 6,0 һәм 6,5 рН кыйммәтләрендә 120 минуттан соң, ферментны тоту дәрәҗәсе якынча 82%, 100% һәм 93% тәшкил иткән.33Хайрин һ.б.42Trametes polyzona WR710-1 лакказасының рН диапазоны 6,0 дән 7,0 гә кадәр тотрыклы булуын билгеләп үттеләр, ә Сәйед һ.б.45лакказа нейтраль рН шартларында тотрыклырак булуын күрсәтте. Шулай да, Cerrena unicolor лакказасы селте шартларында да тотрыклылык күрсәтте (рН 9.0)46Өйрәнелгән лактазалар киң рН диапазонында югары тотрыклылык күрсәттеләр. Бу сәнәгать кушымталары өчен мөһим характеристика булырга мөмкин.
Кайбер металл ионнары фермент активлыгына стимуллаштыручы һәм тоткарлаучы йогынты ясаганлыктан, аларның фермент активлыгына йогынтысын сәнәгать кулланылышларында исәпкә алырга кирәк. Бу бик мөһим, чөнки металл ионнары - күзәнәктән тыш ферментларның тотрыклылыгына һәм синтезына тәэсир итә алырлык киң таралган әйләнә-тирә мохит пычраткычлары.47*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакцазасына күп металл ионнарының йогынтысын тикшерү өчен, без тиешле экспериментлар үткәрдек. 4 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә, кулланылган металл төренә карап, металл ионнары концентрациясен 2,5 мМ дан 10 мМ га кадәр арттыру фермент функциясенә тискәре йогынты ясады. Мәсәлән,Mg²⁺ , Co²⁺ , Zn²⁺, һәмCu²⁺фермент активлыгын стимуллаштырырга һәм активлаштырырга мөмкин, шул ук вакыттаNa⁺ , Mn²⁺ , Ca²⁺, һәмK⁺фермент активлыгын тоткарларга мөмкин иде. 10 мМ концентрациясендә Cu²⁺ һәм Mg²⁺ ионнары *Pleurotus ostreatus* NRC 620 дан алынган лакказа активлыгының иң көчле активаторлары булып, якынча 34% һәм 20% активация дәрәҗәсен тәэмин иттеләр. Ләкин, 10 мМ концентрациясендә Ca²⁺ ионнары лакказаның иң көчле ингибиторы булып, фермент активлыгын якынча 60% ка киметә иде.
Металл ионнарының Pleurotus ostreatus NRC 620 лакказа активлыгына йогынтысы. Лакказа 2,5 мМ һәм 10 мМ концентрациясендә төрле металл ионнарын үз эченә алган натрий фосфаты буферында (0,05 М, рН 7,0) 10 минут инкубацияләнде. Аннары реакция субстрат (ABTS) өстәү белән башланды, аннан соң чагыштырма активлык үлчәнде.
Безнең нәтиҗәләр Mg²⁺ һәм Cu²⁺ *Trametes polyzona* WRF03³ активлыгын арттыруын ачыклаган башка авторларның нәтиҗәләре белән туры килә. Кастано һ.б.⁴⁸ *Xylaria* sp.-тан алынган лакказаның билгеле бер дәрәҗәдә бакыр ионнары (Cu²⁺) белән стимуллашуын ачыкладылар. Моннан тыш, Foroutanfar һ.б.⁴⁹ һәм Si һ.б.⁵⁰ *Paraconiothyrium variabile* һәм *Trametes pubescens*-тан алынган лакказалар буенча охшаш тикшеренүләр үткәрделәр. Бу ферментның II типтагы бакыр бәйләү урыны (T2) билгеле бер концентрациядә Cu²⁺ белән туендырылырга мөмкин, бу югарырак Cu²⁺³⁹ концентрацияләрендә лакказа активлыгының стимуллашуын аңлатырга мөмкин. Ак черегән гөмбәләр лакказалары күп бакыр атомнарын үз эченә алган оксидазалар булганлыктан, бакыр ионнарының лакказа активлыгына йогынтысы төрле һәм стимуллаштыручы һәм тоткарлаучыдан алып нейтральгә кадәр була.⁵¹ Киресенчә, Чжоу һ.б.. [52]хәбәр итте,Cu²⁺Тайвань җир асты термитының (Odontotermes formosanus) лакказа активлыгын тоткарлады. Ләкин, Cerena sp. HYB07 лакказалары[53]һәм Clitocybe maxima[54]бакыр ионнары тәэсир итмәгәннәр.
Субстратның спецификлыгы аның кинетик параметрлары (Km һәм Vmax) белән күрсәтелгән; субстратның фермент белән бәйләнеше ни кадәр көчлерәк булса, Km кыйммәте шулкадәр түбәнрәк һәм субстратның спецификлыгы югарырак.3,21,55*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказасының кинетик параметрлары (Km һәм Vmax) GraphPad Prism 6.0 программасы ярдәмендә Lineweaver-Burk графигын төзеп билгеләнде (5 нче рәсем). ABTS субстрат буларак кулланылганда, нәтиҗәләр 1,99 мМ һәм 16217 мкмоль тәшкил итте.мин⁻¹ L⁻¹,тиешенчә. Элсаед һ.б.21ABTS оксидлашуы өчен Km кыйммәтләренең 0,1 мМ һәм 0,064 мМ булуын хәбәр итте, бу Lac A һәм Lac B изоферментларының ABTS өчен югары бәйләнешен күрсәтә. Моннан тыш, Vmax кыйммәтләре 0,182 мкмоль тәшкил итте.мин⁻¹һәм 0,603 мкмольмин⁻¹, тиешенчә. Алынган Km кыйммәте Trametes polyzona WRF03 кыйммәтеннән (8,66 мМ) түбәнрәк булган; моннан тыш, аларның Vmax кыйммәте (1429 ммоль мин⁻¹) датүбәнрәкABTS субстрат буларак кулланылганда.33 Шулай ук, Lentinus squarrosulus MR13 һәм Trametes sp. AH28-2 лакказа концентрацияләренең Km кыйммәтләре 0,0714 мМ һәм 0,025 мМ тәшкил итте, ә Vmax кыйммәтләре 0,0091 мМ мин−1 һәм 0,67 мМ мин−1 мг−1 иде (ABTS белән чагыштырганда), тиешенчә.56,57
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 лакказа активлыгына ABTS концентрациясенең йогынтысы тикшерелде, һәм башлангыч реакция тизлегенең ABTS концентрациясенә каршы кыйммәтенең Lineweaver-Burk графигы төзелде. Кинетик параметрларны (Vmax һәм Km) билгеләү өчен төрле концентрацияле (0,025–3,0 мМ) лакказа белән ABTS оксидлашу реакциясе рН 4,5 тә үлчәнде. Михаэлис-Ментен кинетик константалары реакция тизлегенең субстрат концентрациясенә каршы кыйммәтенең Lineweaver-Burk графигы ярдәмендә исәпләнде. Кинетик константалар GraphPad Prism 6.01 программасы ярдәмендә Lineweaver-Burk графигыннан исәпләнде.
Пектиназалар кебек традицион ачыкландыручы ферментлар пектин матдәләрен гидролизлый, ябышлыкны һәм тоныклыкны киметә. Алар структураль полисахаридларны нәтиҗәле рәвештә таркаталар һәм еш кына целлюлазалар һәм гемицеллюлазалар кебек башка ферментлар белән бергә кулланыла, нәтиҗәне һәм тоныклыкны яхшырту өчен. Ләкин пектиназалар фенол кушылмаларына махсус тәэсир итми, алар тоныклыкка һәм оксидлашучан көрәнлеккә төп өлеш кертә, бигрәк тә алма һәм йөзем согы кебек сокларда.58Киресенчә, лактазалар фенол кушылмаларының оксидлашуын катализлый, аларны зуррак, эреми торган молекулаларга әйләндерә, аларны чөкмә яки фильтрлау юлы белән чыгарып була. Бу механизм ачыклыкны яхшыртып кына калмый, ә фенол кушылмалары китереп чыгарган оксидлашучан көрәнләшү ихтималын киметү юлы белән сокның саклау вакытын да озайта. Моннан тыш, лактаза нигезендәге ачыклау процессларын йомшак эшкәртү шартларында (рН 3,5–5,5, температура 25–40 °C) үткәрергә мөмкин, бу аларны нечкә соклар өчен яраклы итә, аларның туклыклы яки органолептик үзлекләренә зыян китерми.59Тикшеренүләр күрсәткәнчә, пектиназа белән эшкәртү сокны 1-2 сәгать эчендә ачыклый ала, ә лакказа белән эшкәртү гадәттә фенол кушылмаларын тулысынча киметү өчен озаграк реакция вакытын (3-6 сәгать) таләп итә. Ләкин бу процессны ферментны иммобилизацияләү яки лакказаны механик ачыклау ысуллары белән кушу юлы белән оптимальләштерергә мөмкин.60Бу тикшеренүдә чи экстрактның фермент профилен тикшерү нәтиҗәсендә лакказа һәм α-амилаза активлыгы сизелерлек ачыкланды, ә пектиназа һәм ксиланаза активлыгы бик түбән иде, ә целлюлоза активлыгы ачыкланмады. Шуңа күрә, тоныклык һәм фенол күләменең кимүе, нигездә, лакказа тәэсире белән бәйле, ә ябышлыкның үзгәрүе өлешчә амилаза тәэсире белән бәйле булырга мөмкин.
1 нче таблицада яңа сыгылган алма согы һәм лакказа белән эшкәртелгән үрнәкләрнең физик-химик параметрлары күрсәтелгән. Нәтиҗәләр күрсәткәнчә, яңа сыгылган алма согы (71,59%) лакказа белән эшкәртелгән үрнәкләргә караганда (87,34%) түбәнрәк булган. Бу нәтиҗәләр Пильник һәм Оранж тикшеренүләре нәтиҗәләре белән туры килә.61, җиләк-җимеш эшкәртүдә ферментлар куллану сок күләмен арттырырга, фильтрлауны яхшыртырга һәм югары сыйфатлы, концентрацияле үтә күренмәле сок алырга мөмкинлек бирә дип күрсәттеләр. Сок күләменең артуы, нигездә, сок составында эри торган шикәр күләменең артуы белән бәйле. Җимешләрнең ферментатив гидролизы вакытында продуктның күзәнәк тышчаларындагы мезоглея һәм пектин юк ителә һәм нейтраль шикәрләр һәм кислоталар кебек эри торган матдәләргә әйләнә.62 .Фермент белән эшкәртелгән алма согының рН кыйммәте контроль төркемдәгегә караганда күпкә түбәнрәк булган (P < 0,05), һәм саклау вакытында ике төркемнең дә рН кыйммәте күпкә арткан (1 нче таблица). Бу нәтиҗәләр Марк һ.б. нәтиҗәләре белән туры килә.63, ул җылылык белән эшкәртүдән соң кешью җимеше согының pH күрсәткече сакланганнан соң кимүен билгеләп үтте. Пектин таркалуы һәм фермент белән эшкәртүдән соң галактурон кислотасы барлыкка килүе саклау вакытында pH күрсәткече артуына сәбәпче булырга мөмкин. Фермент белән эшкәртелгән үрнәкләрнең pH күрсәткече саклау вакытында 4,05 һәм 4,31 арасында калган, ә эшкәртелмәгән алма согының pH күрсәткече 4,12 һәм 4,33 арасында булган.
Эшкәртелмәгән һәм лактаза белән эшкәртелгән үрнәкләрнең гомуми кислоталыгы (TA) саклау вакыты арту белән кимү тенденциясен күрсәтте (1 нче таблица). Әслелекнең кимүе органик кислоталарның углеводларга әйләнүе яки ферментатив реакцияләр, шулай ук сок саклау вакытында оксидлашу белән бәйле.64Контроль алма согы һәм фермент белән эшкәртелгән үрнәкләрнең гомуми кислоталыгы башка сокларныкына караганда түбәнрәк булган (җиләк согы 0,9%, слива согы 2,2%, кумкват согы 1,0%, абрикос согы 2,4%, әфлисун согы 0,8%), ләкин башка сокларныкына охшаш (мәсәлән, груша согы 0,3%).62Эшкәртелмәгән яңа сыгылган алма согындагы бу аермалар төрле факторларга, мәсәлән, үсү шартларына, генетик факторларга, өлгерү дәрәҗәсенә һәм эшкәртү ысулларына бәйле булырга мөмкин.65Контроль һәм лактаза белән эшкәртелгән алма согының гомуми кислоталылыгы кимүе Сингх һ.б. тәкъдим иткән нәтиҗәләр белән туры килә.6674 көн сакланганнан соң Jin Nuo алма согының гомуми кислоталылыгы кимүе турында. Икенче яктан, Ошмянский һәм Войдильо67традицион ачыклау ысулларының йогынтысын өйрәнгәндә алма согының кислоталыгында бернинди дә сизелерлек үзгәрешләр тапмады.
1 нче таблицада күрсәтелгән нәтиҗәләр лакказа белән эшкәртелгән алма согының гомуми эри торган каты матдәләр (TSS) кыйммәтенең эшкәртелмәгән үрнәктәгедән югарырак булуын күрсәтә. Бу нәтиҗәләр бастырылган тикшеренүләр белән туры килә.68Моннан тыш, 1 нче таблицада күрсәтелгәнчә, контроль алма согы төркеменең TSS кыйммәте башлангыч вакыт ноктасында 9,58 булган һәм саклау вакыты ахырына 11,05кә җиткән. Бу кыйммәтләр Хәмид һ.б. хәбәр иткән яңа алма согының TSS кыйммәтләреннән түбәнрәк.69(11,2 һәм 11,80, тиешенчә). Лаккоза белән эшкәртелгән алма согы үрнәкләренең TSS кыйммәте сизелерлек артты, 11,23 тән башлап, 4°C температурада ике атна саклаганнан соң 12,93кә җитте (1 нче таблица). Саклау вакытында TSSның охшаш артуы цитрус җимешләрендә, лимоннарда һәм татлы әфлисуннарда да күзәтелде. Саклау вакытында гомуми эри торган каты матдәләрнең (TSS) артуы полисахаридларның (крахмал) моносахаридларга (шикәрләргә) гидролизлануы, сокның сусызлануы аркасында концентрациянең артуы һәм соктагы пектинның эри торган каты матдәләргә таркалуы белән бәйле булырга мөмкин. Гомуми эри торган каты матдәләрнең (TSS) артуы, мөгаен, эри торган шикәрләрнең артуы белән бәйле, алар пектин яки целлюлозаны пектин яки целлюлоза белән эри торган шикәрләргә әйләндерү яки крахмалның шикәрләргә гидролизлануы нәтиҗәсендә барлыкка килергә мөмкин, дип хәбәр итә Хамед һ.б.69.Алма согы үзлекләренә лакказаның йогынтысын күз белән күзәтергә мөмкин, чөнки лакказа белән эшкәртелгән алма согы эшкәртелмәгән сокка караганда яхшырак агып торучанлык һәм түбәнрәк ябышлык күрсәтә. Бу күзәтү 1 нче таблицада теркәлгән; Фермент белән эшкәртелгән үрнәкнең ябышлыгы 1,87 cP, ә контроль үрнәкнең ябышлыгы 2,95 cP иде. Бу ябышлыкның сизелерлек кимүе, мөгаен, пектинга охшаган матдәләрнең су тоту сәләтенең югарырак булуы һәм когезлы челтәр структурасы формалашуы белән бәйле.
Бу тикшеренүдә, лакказаның алма согының кызару индексына (БИ) йогынтысы спектрофотометр ярдәмендә 420 нм да абсорбцияне үлчәү юлы белән тикшерелде. Нәтиҗәләр 1 нче таблицада күрсәтелгән. Саклау вакытында эшкәртелгән һәм эшкәртелмәгән төркемнәрдәге алма согы үрнәкләренең БИ әкренләп арту тенденциясен күрсәтте. БИ кызару дәрәҗәсен чагылдыра һәм ... булып хезмәт итә ала.мөһимферментатив һәм ферментатив булмаган кызару реакцияләренең күрсәткече. Саклау вакытында абсорбция сизелерлек арткан (P < 0,05). Саклау ахырында,A420Контроль һәм фермент белән эшкәртелгән төркемнәрдә алма согы үрнәкләренең бәясе якынча 217% һәм 121% ка арткан (1 нче таблица). Нәтиҗәләр күрсәткәнчә, фермент белән эшкәртү кара төскә керү дәрәҗәсен якынча 56% ка киметә ала. Безерра һ.б. нәтиҗәләре.[19]] безнең нәтиҗәләр белән туры килә; Алар алма согын ачыклау өчен лакказа-глутаральдегид-кокос җепселләрен кулландылар, шуның белән аның башлангыч төсен 61% ка киметтеләр.
Җимеш сокларындагы полифеноллар кеше организмына уңай туклыклы һәм терапевтик йогынты ясаса да, алар аксымнар белән реакциягә керә ала, сок тоныклана, утырма барлыкка килә яки тоныклана, шуның белән продуктның тәмен һәм хуш исен үзгәртә һәм аның саклау вакытын киметә.71Бу тикшеренүнең максаты - Pleurotus ostreatus NRC 620 лакказасын кулланып, алма согындагы фенол кушылмаларын куркынычсыз рәвештә киметү. 1 нче таблицада күрсәтелгән нәтиҗәләр күрсәткәнчә, лакказа белән эшкәртелгән алма согындагы гомуми фенол кушылмалары 4°C температурада саклаганчы сизелерлек кимегән. Моннан тыш, өйрәнелгән ике үрнәктә дә саклау вакытында гомуми фенол кушылмалары да кимегән (1 нче таблица). Сандри һ.б. тикшеренүләре.72фермент белән эшкәртелгән алма согы үзенең антиоксидант активлыгын һәм фенол кушылмалары составын саклап кала алуын күрсәтте. Ләкин, Леттера һ.б. тарафыннан үткәрелгән тикшеренү нәтиҗәләре.73әфлисун согын гөмбә лактазасы белән эшкәртү аның составындагы фенол кушылмалары күләмен 45% ка кадәр киметергә мөмкинлеген күрсәтә.
Фенол кушылмаларының ирекле радикалларны чистарту, синглет кислородны редукцияләү һәм сүндерү, водород атомын күчерү һәм ирекле радикалларга электрон бирү кебек үзлекләргә ия булуы күрсәтелгән, бу аларны көчле антиоксидантлар итә.74Шуңа күрә, бу тикшеренүдә, 14 көн дәвамында суыткычта сакланган алма согының антиоксидант активлыгына лакказаның йогынтысын бәяләү өчен DPPH һәм FRAP нигезендәге ысуллар кулланылды (2 нче таблица). Ике ысул да саклау вакытында антиоксидант активлыгының артуын күрсәтте, бу ирекле фенол кушылмаларының артуы яки Майлард реакция продуктлары (MRP) барлыкка килү белән бәйле булырга мөмкин, Майлард реакция продуктлары антиоксидант активлыгының артуының сәбәбе булырга мөмкин.75Ферментатив булмаган көрәнү реакцияләре (шул исәптән аскорбин кислотасы деградациясе, Майяр реакцияләре һәм шикәрләрнең кислота катализланган деградациясе) көрән пигментлар (меланоидиннар) барлыкка китерә. Арадаш аскорбин кислотасы деградация продуктлары һәм шикәр деградация продуктлары (мәсәлән, карбонил кушылмалары) аминокислоталар белән Майяр реакцияләре аша реакциягә керә ала.76Саклау вакытында җиләк-җимеш һәм яшелчәләрнең кызаруы киң өйрәнелсә дә, бу реакцияләрне аңлавыбыз чикле булып кала.77FRAP ысулы белән чагыштырганда, лакказа белән эшкәртелгән алма согы DPPH ысулы белән күпкә түбәнрәк антиоксидант активлык күрсәтте (2 нче таблица), һәм барлык үрнәкләрнең антиоксидант активлыгы саклау вакыты арткан саен күпкә артты. Бу тикшеренүдә антиоксидант активлыгын билгеләү өчен ике төрле ысул кулланылды, чөнки аларның принциплары төрле. DPPH ысулы ирекле радикалларны нейтральләштерү сәләтен үлчи, ә FRAP ысулы тимер ионнарын киметү сәләтен үлчи. Шуңа күрә, өйрәнелгән үрнәкләрнең антиоксидант активлыгын яхшырак аңлау өчен антиоксидант активлыгын билгеләү өчен берничә ысул куллану тәкъдим ителә.78
Бу тикшеренүнең төп ачышларының берсе - *Pleurotus ostreatus* лакказасы NRC 620 70°C һәм рН 3.0 температурада оптималь активлык күрсәтә. Сокны ачыклау өчен еш кулланыла торган башка гөмбә лакказалары, мәсәлән, *Trametes versicolor* һәм *Ganoderma lucidum* лакказалары белән чагыштырганда, *P. ostreatus* NRC 620 югарырак термик тотрыклылык һәм кислоталырак рН күрсәтә. *Trametes versicolor* һәм *Ganoderma lucidum* лакказалары гадәттә 50-60°C диапазонында һәм рН 3.5 һәм 5.0 арасындагы кыйммәтләрдә оптималь активлык күрсәтә. Бу аерма сокны ачыклау нәтиҗәлелеген яхшыртуга ярдәм итә ала, бигрәк тә түбән рН кыйммәтләрендә тотрыклылык бик мөһим булган кислоталы соклар өчен. *P.ның уникаль үзенчәлеге. Башка өйрәнелгән гөмбә лакказалары белән чагыштырганда, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 катлаулырак шартларда нәтиҗәле эшли алу сәләтен күрсәтә. Аның югарырак оптималь активлык температурасы сәнәгать кушымталарында потенциаль өстенлекләрне күрсәтә, мәсәлән, тизрәк реакция тизлеге һәм микроб пычрануының кимүе. Күп сокларның кислоталы табигатенә яхшы туры килә торган түбән pH сокны ачыклау процессларында файдалы булырга мөмкин. Бу нәтиҗәләр киң күләмдә куллану өчен алга таба тикшеренүләрне аклый, бу *Pleurotus ostreatus* NRC 620 традицион гөмбә лактазасы чыганакларына яраклы альтернатива итә. Элегрәк үткәрелгән тикшеренүләр белән чагыштырганда, без оптималь температураның 60°C, ә оптималь pHның 3.0 булуын ачыкладык. 60°C температурада 80 минут реакциядән соң, *Ganoderma lucidum* лактазасы сакланып калды.46аның активлыгының %.79 Курниавати һәм Ницель буенча80, *Ganoderma lucidum* ферментлары 25°C температурада һәм 5,0 дән 8,0 гә кадәр рН кыйммәтләрендә бик яхшы яки уртача тотрыклылык күрсәтә, ә рН 6,0 һәм 10 дән 30°C га кадәр температураларда тотрыклылык күрсәтә. Бу тикшеренүдә без *Pleurotus ostreatus* өчен фермент активлыгы өчен оптималь рН һәм температураның 3,0 һәм 70°C булуын ачыкладык. Ике сәгать дәвамында 40°C һәм 50°C температурада инкубацияләгәннән соң, фермент үз активлыгының 68,33% һәм 59,61% ын саклап калган. Моннан тыш, Pleurotus ostreatus NRC 620 лакказе 50°C дән 80°C га кадәр киң температура диапазонында югары активлык күрсәтте, максималь активлыкка диярлек иреште (69%–98%), максималь активлык 70°C температурада күзәтелде.
Нәтиҗә ясап шуны әйтергә мөмкин: статик шартларда алынган устрица гөмбәсе лакказасы NRC620 төрле рН һәм температура шартларында оптималь активлык һәм тотрыклылык күрсәтте, башка фермент чыганаклары белән чагыштырганда югарырак тотрыклылык күрсәтте. 10 мМ MgSO₄ һәм CuSO₄ өстәү фермент активлыгын якынча 21% һәм 35% ка арттырды. Алма согына эшкәртелгәндә, фермент рН һәм ябышлыкны киметте, ә саклау вакытында фенол күләме бераз гына кимеде.
Нәтиҗәләр лакказның азык-төлек сәнәгатендә, бигрәк тә эчемлекләр өчен ачыкландыруда потенциалын раслый. Фенол кушылмаларын махсус таркату аша, лакказ тоныклыкны киметә һәм ачыклыкны яхшырта гына түгел, ә йомшак эшләү шартларында җимеш сокларының сыйфатын да саклый. Желатин, бентонит һәм силикагель кебек традицион ачыкландыручы матдәләрдән аермалы буларак, лакказ калдыклар тудырмый яки эчемлекләрдән хуш исләрне бетерми, бу аны экологик яктан чистарак һәм тотрыклырак вариант итә. Моннан тыш, башка ферментлар һәм фильтрлау ысуллары белән чагыштырганда, лакказ продукт сыйфатына зыян китермичә, максатчан һәм экономияле чишелеш тәкъдим итә.
Kyomuhimbo, HD һәм Brink, HG. Бакырлы лактазаларның кулланылышы һәм иммобилизация стратегияләре; күзәтү. Heliyon 9, e13156 (2023).
Бастырып чыгару вакыты: 2025 елның 15 декабре